Ófrjósemisaðgerðer hornsteinn frumulíffræði og líflæknisfræðilegra tilrauna. Flestar lífeðlisfræðilegar rannsóknarstofur myndu ekki geta framkvæmt neina vinnu sem felur í sér að rækta lifandi frumur án dauðhreinsaðra rannsóknarstofutækja. Þó að margar rannsóknarstofur njóti óformlegs sambands við ófrjósemi, er afar sjaldgæft að vanmeta áhrif þess að hafa dauðhreinsuð rannsóknarstofutæki. Engu að síður er ófrjósemisaðgerð oft sett í mikilvæg verk fyrir starfsfólk á frumstigi rannsóknarstofu, líkt og að þrífa glervörur.
Veikt dauðhreinsunarferli á tækjum getur leitt til meiri fjárhagslegs tjóns en algjör skortur á ófrjósemisaðgerðum. Þegar rannsóknarstofur nota illa sótthreinsaðan búnað geta tilraunir auðveldlega mengast, sem leiðir til taps vegna ónothæfra eða óeðlilegra niðurstaðna. Í sumum tilfellum getur mengaður búnaður mengað önnur tæki eða vélbúnað, sem veldur því að rannsóknarstofan lendir í mörgum tilraunabilunum sem erfitt getur verið að einangra og lagfæra. Til að forðast þessar gildrur ófullnægjandi dauðhreinsunar þarf stranga og árangursmiðaða nálgun til að fylgjast með ófrjósemi - aðferð sem margar rannsóknarstofur gætu haft gott af að taka upp.
Hvaða tæki þarf að dauðhreinsa?
Ófrjósemisaðgerð er afar mikilvæg fyrir hverja rannsóknarstofu sem sinnir frumuræktunarvinnu, svo mjög að það er ekki ofsögum sagt að öll rannsóknarstofutæki sem taka þátt í frumuræktun verði að vera dauðhreinsuð. Flestar rannsóknarstofur eru með mikið af vélbúnaði og jafnvel þótt þær stundi frumuræktun þá taka þær ekki beinan þátt í frumuræktunarvinnunni. Mikilvægt er að jafnvel búnaður sem ekki tekur þátt í frumuræktun getur notið góðs af ófrjósemisaðgerð - að því gefnu að rannsóknarstofan hafi efni á kostnaði við ófrjósemisaðgerð.
Til dæmis, rannsóknarstofum sem reglulega framkvæma erfðafræðilega raðgreiningu eða PCR getur fundist það erfið efnahagsleg uppástunga að dauðhreinsa pípetturnar og varma hringrásina sem nauðsynlegar eru til að framkvæma sameindalíffræðivinnu. Vegna þess að þessi tæki taka ekki þátt í frumurækt, eru afleiðingar þess að vera ekki fullkomlega dauðhreinsaðar í lágmarki - eða þannig eru rökin. Það sem skiptir höfuðmáli er að þessi röksemdafærsla er röng.
Þó að það sé rétt að líffræðileg mengun á þessum tækjum muni ekki valda því að mjög dýrar frumuræktunartilraunir deyja eftir útsetningu fyrir röngum örverum, jafnvel ex vivo tilraunir geta skemmt niðurstöður þeirra vegna rangrar útsetningar fyrir líffræðilegum efnum.
Ófrjósemisaðgerð er mikilvæg varúðarráðstöfun, jafnvel fyrir rannsóknarstofubúnað sem hefur aldrei verið beint fyrir líffræðilegu efni. Til dæmis, með því að sótthreinsa inni í líföryggisskáp, getur rannsóknarstofa tryggt að vinnusvæði fyrir tilraunir hennar verði ekki uppspretta mengunar. Sömuleiðis tryggir dauðhreinsun glervöru að hægt sé að nota það við hliðina á viðkvæmum tilraunum án þess að óttast að eyðileggja niðurstöður.
Hins vegar hafa ekki allar rannsóknarstofur fjármagn til að dauðhreinsa allt sem gæti gagnast. Ófrjósemisaðgerð er oft dýr, þannig að flestar rannsóknarstofur setja ófrjósemisaðgerðir á mikilvægum búnaði í forgang en leyfa öðrum tækjum í burtu frá frumuræktarsvæðinu að vera ósótthreinsuð. Þess vegna er það góð venja að skrá ófrjósemisaðgerðir fyrir starfsmenn á rannsóknarstofum, þar sem vélbúnaður sem ekki er hægt að nota án ófrjósemisaðgerðar er lítið gagn ef flest annar búnaður á rannsóknarstofunni er ekki sótthreinsaður í röð.
Hvað rannsóknarstofur þurfa meðan á ófrjósemisaðgerð stendur
Ófrjósemisaðgerðin hefur nokkur mismunandi stig sem hvert um sig krefst mismunandi pláss innan rannsóknarstofunnar. Staðbundið flókið ófrjósemisaðgerð fer eftir því hvort rannsóknarstofan stundar rannsóknir, klíníska vinnu eða framleiðslu. Framleiðsla og klínísk vinna hafa hærri ófrjósemisstaðla en rannsóknarvinna, þannig að aðskilnaður og flókið dauðhreinsunarrými er meira áberandi. Í stuttu máli eru þrjú rými sem þarf fyrir dauðhreinsunarferlið:
afmengunarsvæði
pökkunarsvæði
Ófrjósemisaðgerð svæði
Hvert rými hefur annan tilgang, sem samsvarar því stigi ófrjósemisaðgerðarinnar sem það er ábyrgt fyrir húsnæði. Afmengunarsvæðið er þar sem grundvöllur ófrjósemis er komið á, fjarlægir eins mikið af mengunarefnum og mögulegt er með því að nota grófar aðferðir eins og hreinsun með ósæfðu vatni eða hreinsiefni.
Vegna þess að afmengun er oft sóðalegt mál, kjósa flestar rannsóknarstofur að hafa afmengunarrými utan aðalvinnustofu rannsóknarstofu. Tilgangur afmengunar er að fjarlægja alla sýnilega mengun frá tækinu eða búnaðinum sem verið er að dauðhreinsa. Þetta gæti falið í sér allt frá óhreinindum til klessandi hreinsiefna. Mikilvægt er að afmengunarferlið skilji ekkert eftir sig sem ekki var til staðar áður en ferlið hófst. Því lýkur flestum afmengunarferlum með því að hreinsa búnaðinn með vatni.
Eftir afmengun verður rannsóknarstofan að pakka búnaðinum sem á að afmenga þannig að virkt yfirborð vélbúnaðarins geti orðið fyrir dauðhreinsunartækinu en ekki utanaðkomandi lofti eða öðru umhverfi sem gæti leitt til nýrrar mengunar.
Til dæmis, til að nota heita gufu til að dauðhreinsa innri tunnu í autoclave, myndir þú "pakka" tunnunni með því að setja álpappírsstykki lauslega ofan á munninn á tunnunni og teipa það á hliðarnar. Svo við autoclaving Þegar heita gufan í dauðhreinsunartækinu dauðhreinsar fötuna getur gufan flætt undir filmunni, sótthreinsað virkt yfirborð fötunnar (innra hluta sem geymir vökvann) og flæðir síðan út. Vegna þess að filman er teipuð við tunnuna, verður starfrænt yfirborð tunnunnar varið gegn veðrum og dauðhreinsuðu jafnvel eftir að tunnan er fjarlægð úr autoclave. Hins vegar, fyrir rannsóknarstofur sem meðhöndla klínísk efni eða framleiða lyf, er staðallinn fyrir dauðhreinsaðar umbúðir langt út fyrir einfalda álpappírsfötulausn.
Ófrjósemissvæðið er hjarta ófrjósemisferlisins. Það fer eftir nálgun rannsóknarstofunnar, getur dauðhreinsunarsvæðið notað eina af nokkrum mismunandi dauðhreinsunaraðferðum. Þessar aðferðir geta falið í sér heita gufu og þrýsting, eins og í venjulegum rannsóknarstofuautoclave, eða framandi aðferðum, eins og gammageislun. Flestar rannsóknarstofur halda sig við hvaða dauðhreinsunaraðferð sem er í boði í aðstöðu þeirra, sem þýðir að nota autoclave í langflestum tíma. Hins vegar, fyrir rannsóknarstofur sem taka þátt í framleiðslu lyfja eða lækningatækja, er geislun algengari.
Staðfesting ófrjósemisferlis
Eftir að ófrjósemisaðgerð er lokið, hafa flestar rannsóknarstofur eina af nokkrum aðferðum til að sannreyna að búnaður þeirra sé sannarlega að fullu dauðhreinsaður en ekki bara dauðhreinsaður að hluta. Auðveldasta leiðin til að sannreyna þetta er með auðmjúku autoclave límbandinu. Þó að það henti aðeins til að sannreyna dauðhreinsun í samhengi við autoclave, er autoclave borði áhrifaríkt vegna þess að það breytist þegar það verður fyrir dauðhreinsunaraðstæðum í þann tíma sem þarf til að tryggja fullkominn dauðhreinsunarlit. Þess vegna nota margar rannsóknarstofur autoclave límband mikið meðan á dauðhreinsunarferlinu stendur.
Flóknari ófrjósemisprófun krefst frumuræktunartilrauna. Í dæmigerðri ófrjósemissannprófunartilraun er sýni af lífvænlegri bakteríurækt látin fara í gegnum dauðhreinsunarferli sem notað er á rannsóknarstofunni og síðan er ílát ræktunarinnar þurrkað til að fá lífvænlegar frumur. Strokurnar eru síðan ræktaðar í nokkra daga og nýjar frumubyggðir skoðaðar. Ef engar nýlendur stækka er dauðhreinsunarferlið vel.
Að láta ófrjósemisleiðslur ná árangri
Áður en rannsóknarstofur geta sótthreinsað tengdan frumuræktunarbúnað þurfa þær að hafa viðeigandi birgðir til staðar. Það getur verið erfitt að fylgjast með því mikla magni hvarfefna, hreinsiefna og einnota sem þarf til ófrjósemisaðgerða, sérstaklega fyrir rannsóknarstofur án langrar sögu um smitgát eða dauðhreinsaða framleiðslu. Fyrir allt frá autoclave borði til hreinsilausna á afmengunarstigi er vinna með reyndum birgi stór þáttur í því að styðja við árangursríka dauðhreinsun og tilraunir.





