Góðsmásjáætti að hafa þrjá eiginleika:
Góð upplausn: Upplausnargeta vísar til hæfileikans til að framleiða aðskildar myndir af hlutum sem eru þétt settir þannig að hægt sé að greina þá sem tvær aðskildar einingar. Upplausn:
Um það bil 0,2 mm (200μm) með berum augum
Ljóssmásjá er um 0.2μm
Rafeindasmásjárskoðun er um 0,5 nm
. Upplausnin fer eftir brotstuðul. Olía hefur hærri brotstuðul en loft.
Góð birtuskil: hægt að bæta enn frekar með því að lita sýnið.
Góð stækkun: Þetta er náð með því að nota íhvolfa linsur.
Brightfield eða ljóssmásjá
Brightfield eða ljós smásjá framleiðir dökkar myndir gegn ljósari bakgrunni.
dökksviðssmásjárskoðun
Meginregla: Í dökksviðssmásjárskoðun virðast hlutir bjartir gegn dökkum bakgrunni. Þetta er hægt að ná með því að nota sérstaka darkfield þéttara.
Notkun: Notað til að bera kennsl á lífvænlegar, ólitaðar frumur og þunnar bakteríur eins og Spirochaetes sem ekki er hægt að sjá með ljóssmásjá.
fasa andstæða smásjá
Það sér lifandi frumur fyrir sér með því að búa til andstæða mun á frumum og vatni. Það breytir lúmskur munur á brotstuðul og frumuþéttleika í auðveldlega greinanlegar breytingar á ljósstyrk.
Gagnlegt fyrir nám:
hreyfingu örvera
Ákvarða lögun lifandi frumna
Greina íhluti baktería eins og endospores og innilokunarlíkama.
Flúrljómunarsmásjá
Hvernig það virkar: Þegar flúrljómandi litarefni verða fyrir útfjólubláu (UV) ljósi, eru þau spennt og flúrljóma, þ.e. þau breyta þessum ósýnilega stuttbylgjulengda geisla í lengri bylgjulengd ljós (sýnilegt ljós).
Notkun: Flúrljómunarsmásjárgreining hefur eftirfarandi forrit:
Sjálfflúrljómar þegar það er sett undir útfjólubláu ljósi, eins og sýklósporín
Örverur húðaðar með flúrljómandi litarefnum, eins og atriol appelsínugult fyrir malaríusníkjudýr (QBC) og aurinol fyrir Mycobacterium tuberculosis.
Ónæmisflúrljómun: Það notar mótefni merkt með flúrljómandi litarefnum til að greina frumuyfirborðsmótefnavaka eða mótefni sem bindast frumuyfirborðs mótefnavaka. Það eru þrjár gerðir: bein IF, óbein IF og frumuflæðismæling.
rafeindasmásjá
Það var fundið upp af Ernst Ruska árið 1931. Það er ólíkt ljóssmásjárskoðun á annan hátt.
Það eru tvær tegundir af EM:
Sending EM (MC gerð, skoðar innri uppbyggingu, upplausn 0.5 nm, gefur tvívíddarsýn)
Skönnun EM (skoðar yfirborðið með 7 nm upplausn, gefur 3D mynd)
Meginreglur sendingarrafeindasmásjár
Sýnaundirbúningur: Framkvæmdu eftirfarandi skref á frumum til að undirbúa mjög þunn sýni (20 til 100 nm þykkt)
Festing: Festa frumur með glútaraldehýði eða tetroxíði til að koma á stöðugleika.
Afvötnun: Sýnið er síðan þurrkað með því að nota lífrænan leysi eins og asetón eða etanól.
Innfelling: Sýnið er fellt inn í plastfjölliða sem síðan harðnar og myndar fastan massa. Flestar plastfjölliður eru vatnsóleysanlegar. Þess vegna verða sýni að vera alveg þurrkuð áður en þau eru innfelld.
Skurðskurður: Sýnið er síðan skorið í þunna hluta með örmíkrótómi og hlutarnir festir á málmrennibrautir (kopar).
Frostætunartækni: Þetta er önnur aðferð til að sjá frumulíffæri inni í frumum til að undirbúa sýni.
Frumurnar eru fljótfrystar, síðan hitaðar → rifnar með hníf til að afhjúpa innri frumulíffæri → sublimated → þakið platínu og kolefnishúð.
Aðgerðir til að bæta EM birtuskil eru:
Litun með lausnum af þungmálmsöltum eins og blýsítrati og úranýlasetati
Neikvæð litun með þungmálmum eins og fosfówolframsýru eða úranýl asetati.
Skygging: Sýnið er húðað með þunnri filmu af platínu eða öðrum þungmálmi í 45 gráðu horni þannig að málmurinn hittir örverurnar aðeins á annarri hliðinni.
